Test de Legionella sur les navires de croisière : utiliser la qPCR pour atténuer les risques et protéger les passagers

Cet article a été écrit à l'origine pour Produits de qualité de l'eau by LuminUltra Les technologies.

La pandémie de COVID-19 a entraîné d'importantes fermetures et réductions des activités commerciales et de voyage. Lorsque les gens ont commencé à travailler à domicile, les immeubles de bureaux fonctionnaient à capacité considérablement réduite, ce qui signifie que les systèmes d'eau des bâtiments fonctionnaient à des débits réduits ou étaient même fermés. De même, de nombreux avions de passagers ont été cloués au sol et les navires de croisière ont interrompu leurs opérations.

Un effet involontaire de ces arrêts est que, s'ils ne sont pas correctement gérés, les systèmes d'eau stagnante dans les bâtiments et sur les navires pourraient fournir un environnement hospitalier propice à la prolifération d'agents pathogènes, comme Legionella.

Qu’est ce qu' Legionella?

Legionella est un genre de bactéries que l'on trouve largement dans les environnements aquatiques, en particulier dans les systèmes d'eau construits avec des températures chaudes et des sections stagnantes. Legionella sont responsables de la maladie du légionnaire, une pneumonie grave et potentiellement mortelle, ainsi que de la fièvre de Pontiac, une infection moins grave. La maladie du légionnaire a été identifiée pour la première fois à la suite d'une épidémie survenue lors d'une convention de la Légion américaine à Philadelphie en 1976. Une enquête menée par les Centers for Disease Control and Prevention (CDC) des États-Unis a identifié Legionella pneumophila comme la cause de l'épidémie, qui aurait entraîné plus de 200 infections et 29 décès.

Les symptômes de la maladie du légionnaire comprennent : toux, essoufflement, fièvre, douleurs musculaires, maux de tête, diarrhée, nausées et confusion. Selon le CDC, les personnes en bonne santé sont généralement capables de se remettre d'infections, mais nécessitent souvent une hospitalisation. Les personnes à risque accru d'exposition comprennent les adultes de plus de 50 ans, les fumeurs, les gros buveurs ou les personnes atteintes d'une maladie pulmonaire chronique, d'un cancer, de maladies sous-jacentes ou d'un système immunitaire affaibli. Les complications de la maladie du légionnaire peuvent entraîner une insuffisance pulmonaire ou la mort.

La fièvre de Pontiac est une maladie moins grave qui peut provoquer de la fièvre et des douleurs musculaires et l'infection disparaît généralement en quelques jours sans traitement médical.

Plus de 50 Legionella espèces ont été identifiées et celles-ci peuvent être divisées en environ 70 sérogroupes. En général, la majorité des infections humaines sont causées par Legionella pneumophila sérogroupe 1, bien qu'environ la moitié de tous Legionella espèces ont été associées à la maladie du légionnaire.

Les cas de maladie du légionnaire ont augmenté au cours des 20 dernières années, faisant Legionella l'une des sources les plus importantes de maladies d'origine hydrique aux États-Unis

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Pourquoi les tests sont-ils importants pour les navires de croisière ?

La maladie du légionnaire peut survenir lorsqu'une personne inhale de petites gouttelettes d'eau contenant Legionella bactéries. Les sources courantes comprennent les tours de refroidissement, les douches et les robinets, les fontaines décoratives et les bains à remous. Les cas ont été liés à divers types d'établissements, notamment des hôpitaux, des hôtels, des établissements de soins de longue durée et des navires de croisière. Avec 125 nouveaux navires de croisière qui devraient entrer dans la flotte mondiale d'ici 2027, portant le nombre de navires à plus de 550 et offrant une capacité d'environ 40 millions de passagers par an, le maintien de la santé des passagers est d'une grande importance.

Les sources les plus courantes de maladies d'origine hydrique à bord, telles que les légionnaires, proviennent des systèmes d'eau de refroidissement, des robinets, des douches, des bains à remous, des bains à remous et des filtres en ligne. Des températures de chauffe-eau inférieures à 50°C peuvent augmenter le risque de maladie du légionnaire en raison de la prolifération bactérienne dans le réservoir, et le risque est particulièrement important entre 40 et 50°C.

Alors que les ferries à passagers et les navires de croisière plus grands et plus récents ont été construits avec des solutions d'assainissement plus avancées et ont adopté des mesures préventives - comme encourager les passagers à se désinfecter les mains à l'entrée des espaces publics - la proximité de milliers de passagers est liée à un défi de santé publique. Peu a été fait pour protéger les passagers à bord de navires plus petits et plus anciens qui, dans de nombreux cas, ont des systèmes d'eau plus anciens qui ne sont pas aussi bien entretenus.

Cela était évident dans le document de recherche Legionella Évaluation des risques dans les navires de croisière et les ferries, publié en juin 2017 par la National Library of Medicine des National Institutes of Health des États-Unis. Les chercheurs ont évalué la fréquence et la gravité des Legionella contamination sur 10 ferries et six navires de croisière à côté ou en transit dans le port de Messine, en Sicile. A partir des échantillons d'eau et d'air testés pour l'identification qualitative et quantitative de Legionella, les chercheurs ont découvert que Legionella pneumophila sérogroupe 1, qui est le plus souvent associé à des cas de maladie du légionnaire, était présent dans des échantillons de douche et d'eau du robinet dans 70 % des 10 ferries examinés et dans 33 % des six navires de croisière examinés. Ils ont trouvé Legionella pneumophila sérogroupes 2-14 dans des échantillons de 80 % des ferries et dans des échantillons de 16 % des navires de croisière qui ont été examinés.

Tandis que Legionella aucune contamination n'a été trouvée dans les échantillons de bain à remous, d'air ou de glace, ils ont conclu que des niveaux plus élevés de Legionella des contaminations ont été trouvées dans les ferries et les navires de croisière locaux, soulignant la nécessité de mesures correctives qui ciblent directement les petits navires.

Comment tester pour Legionella

Une méthode commune pour la surveillance environnementale des Legionella consiste à utiliser des tests de culture, qui sont généralement effectués dans des laboratoires spécialisés selon des méthodes standard, telles que celles publiées par le CDC ou l'ISO. En général, les échantillons d'eau prélevés sur le terrain sont expédiés sur glace à un laboratoire. Les échantillons peuvent ensuite être filtrés pour concentrer les cellules microbiennes, qui sont ensuite mises en suspension dans un petit volume d'eau stérile, ou traitées directement sans filtration, selon le type d'eau et les concentrations anticipées. La suspension est ensuite ajoutée à une plaque contenant de la gélose à l'extrait de levure de charbon tamponné (BCYE) et incubée.

La technique de culture a une histoire relativement longue et de nombreux opérateurs sont familiers avec le test. Divers règlements et documents d'orientation sont disponibles, fournissant des informations utiles pour aider les opérateurs à évaluer leurs résultats. Un inconvénient important est que le test est lent, nécessitant plusieurs jours pour être traité, puis pour que le laboratoire fournisse un rapport. Les délais d'exécution courants sont de l'ordre de 10 à 14 jours, ce qui signifie qu'il n'est pas possible d'utiliser les données pour les changements opérationnels de routine.

Le test peut également sous-estimer la quantité totale de Legionella qui sont présents. Premièrement, si les cellules sont stressées, que ce soit par exposition à un biocide ou par manque de nutriments, elles peuvent entrer dans un état viable mais non cultivable (VBNC). Cela signifie que les cellules sont vivantes, potentiellement encore capables de provoquer une infection, mais ne se développeront pas par la méthode de culture. De plus, la gélose BCYE favorise la croissance de Legionella pneumophila par rapport à d'autres espèces, ce qui peut également provoquer des infections. Finalement, Legionella poussent souvent au sein des hôtes protozoaires. Ces hôtes offrent un environnement hospitalier, abritant Legionella à partir de biocides, tout en fournissant des nutriments. Les tests de culture peuvent souvent échouer à détecter Legionella qui se développent au sein de ces hôtes.

Qu'est-ce que la qPCR?

Une autre méthode de mesure Legionella est l'utilisation de la qPCR. Il s'agit d'une méthode rapide qui utilise l'ADN pour tester le micro-organisme cible. L'un des avantages de la méthode qPCR est qu'elle est hautement spécifique. Les tests sont conçus pour détecter spécifiquement une séquence génomique cible qui est unique à votre organisme cible (par ex. Legionella pneumophila) ou un groupe d'organismes (par exemple tous Legionella espèce). Plus important encore, la méthode est rapide. L'ensemble du test, de la collecte de l'échantillon à la collecte de la mesure finale, peut être effectué en quelques heures, ce qui signifie que les résultats peuvent être utilisés pour appuyer rapidement les décisions opérationnelles.

Alors que les techniques de PCR sont largement utilisées depuis des décennies, comme dans les applications de diagnostic clinique, où qPCR est considérée comme la méthode d'essai de référence, son utilisation dans les applications industrielles et environnementales s'est développée. Cette adoption plus lente peut s'expliquer en partie par le fait qu'historiquement, la qPCR était une technique de laboratoire, de sorte que son avantage en tant que méthode rapide a été diminué par le fait que les échantillons devaient encore être expédiés à un laboratoire et que les résultats pourraient ne pas être fournis. pour quelques jours. Plus récemment, les kits sur le terrain ont offert une solution unique à cela, ce qui signifie que les tests pourraient être effectués sur le terrain par les opérateurs, fournissant des résultats exploitables qui pourraient être obtenus dans les deux heures suivant le prélèvement des échantillons. De plus, les tests qPCR sont très sensibles, ce qui les rend adaptés à la réalisation de tests de dépistage.

Un inconvénient de l'approche basée sur la qPCR est qu'elle peut potentiellement détecter l'ADN des cellules mortes ; cependant, ces méthodes incluent des étapes de filtration afin que l'ADN des cellules lysées passe à travers le filtre et ne soit pas détecté, ce qui signifie que seul l'ADN des cellules intactes peut être détecté. Il convient également de noter que la qPCR est recommandée pour la surveillance de routine, où l'objectif est d'établir des lignes de base typiques et de surveiller la croissance. Grâce à cette approche, tout impact des cellules mortes n'est pas pertinent, car les cellules mortes ne se développent pas.

Gestion de l'eau des navires de croisière

Compte tenu de la complexité des systèmes d'eau à bord et du potentiel de stagnation en raison de périodes d'arrêt prolongées ou de temps de rétention dans les réservoirs du système, il est important pour les exploitants de navires de croisière de mettre en œuvre un programme de gestion de l'eau qui comprend des opérations de surveillance et de contrôle efficaces.

Un élément clé du plan de gestion est d'inclure une surveillance de routine pour échantillonner et surveiller fréquemment les systèmes d'eau. Le test qPCR est une méthode idéale pour surveiller Legionella sur les navires de croisière, où l'accès à des laboratoires spécialisés n'est pas disponible. Si les données indiquent que Legionella les bactéries prolifèrent, des mesures immédiates peuvent être prises par les opérateurs du système. Cela devrait inclure une analyse des risques pour trouver la cause profonde de la prolifération.

Un moyen très efficace d'identifier la source de prolifération est la cartographie microbienne du réseau. Ceci est réalisé en échantillonnant et en analysant l'eau à différents endroits du système pour identifier la zone de prolifération principale. Une fois la source de contamination identifiée, les mesures correctives possibles pourraient inclure l'ajustement des températures de l'eau pour la désinfection thermique ou le rinçage de la tuyauterie du système pour fournir de l'eau douce avec des résidus de biocide.

Réduire le risque

Il est important d'avoir un programme efficace de gestion de l'eau à bord pour assurer la sécurité et le confort de tous les invités et de l'équipage. Pour aider à réduire le risque de Legionella, cela devrait inclure une surveillance proactive.

La qPCR sur le terrain fournit un moyen efficace d'effectuer un programme de dépistage global pour identifier les points chauds potentiels, puis d'effectuer des tests de suivi de routine pour surveiller la croissance, donnant aux opérateurs la possibilité de réagir rapidement avec des actions préventives.


LuminUltra équipe

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